日光浴的懒猫
由于我本身是学计算机的，现在以及未来的研究方向主要是生物信息学。所以，仔细学习一下分子生物学很有必要，因为很多生物的实验原理以及生物学概念（转座子、增强子、顺式调控元件等等）在看论文的时候如果没接触过，很容易看的头大。因此本文面向的主要对象是计算机专业，研究生物信息等领域的初学者。 废话不多说了，我阅读的教材是朱玉贤的第4版，由于是从阅读到中间开始记录的。部分没有记录的章节要点稍后补全。 第5、6章主要讲常用的实验技术，对明白生物相关的论文为什么要做某些实验，以及在要找相关的数据的时候，用哪种实验的数据都很有帮助。 重组DNA通常是通过将特定DNA片段整合到病毒或者质粒等载体上，构成重组DNA，通过侵染或者注入等形式进入宿主细胞。使得宿主细胞得以表达某些DNA，通常的目的有：合成蛋白质，研究某些DNA的功能等。 重组DNA的必备原料有： 部分载体具有多克隆位点：即包含多个限制性酶切位点，他们是外源基因的插入部位，通过多克隆位点可以实现多种不同的DNA重组，如可以同时获得多种抗性。 蓝白斑筛选：DNA重组并得以在宿主内表达的菌落呈白色，而非转化的菌落呈蓝色。 细菌转化：将外源的DNA分子和载体进行重组后，需要将其送到宿主内，通常如大肠杆菌等对重组后的DNA吸收能力差，需要使用如氯化钙处理，才能够较好的吸收这些重组DNA，使其在宿主细胞内表达。 经过Cohen和Boyer等人的研究发现：某些高等生物如非洲爪蟾的基因，也可以通过DNA重组技术移到原核细胞（如大肠杆菌）中，并能够成功表达。 由于DNA链的多核苷酸呈阴离子状态，放在电场中，会向正极移动，移动的距离和构成DNA的核苷酸的数量相关（因为每个核苷酸带的电量基本是相同的），由于其带的电荷量以及分子大小的不同，在电泳中迁移的速率不同，迁移的距离也不同，故能够分离DNA片段。 通常凝胶对DNA片段的分辨能力与浓度有关。相同类型的凝胶，浓度越高，截止的空隙越小，对DNA分子的分布能力越强，就可以分离更小尺寸的DNA片段。反之，浓度越大，只能分离长度较大的片段。 对于超大DNA片段（>50kb），普通的琼脂糖凝胶电泳很难分离，因此发明了脉冲电场凝胶电泳。 PCR是体外快速扩增待定基因或DNA序列的常用方法，具体步骤如下： 基于聚合酶制造的PCR仪实际就是一个温控设备，能在变性温度，复性温度，延伸温度之间很好地进行控制。 PCR反应五要素：引物(PCR引物为DNA片段，细胞内DNA复制的引物为一段RNA链）、酶、dNTP(脱氧核糖核苷三磷酸)、模板DNA和缓冲液（其中需要Mg2+）。
旷野和风
一、真核基因组的结构特点:
1.编码序列所占比例远小于非编码序列。
2.高等真核生物基因组含有大量的重复序列。
3.存在多基因家族和假基因。
4.基因通过可变前接能改变蛋白质的序列。
5.真核基因组DNA与蛋白质结合形成染色体。
二、半保留复制的概念。
1.DNA复制时除代DNA双螺旋解开成为两条单链。
2.自作为模板按照碱基配对规律合成-条与模板相互补的新链，形成两个子代DNA分子。
3.每一个子代DNA分子中都保留有一条来自亲代的链。
三、半不连续复制。
1.DNA双螺旋结构中两股单链反向互补平行，一股链的方向为5' →3',另一股链的方向为3'→5'。
2.复制时合成的互补链方向则对应为3'→5和5'→3' ,而生物体内DNA的合成方向只能是5'→3’。
3.复制时,顺着解链方向生成的一股子链其合成方向与解链方向相同，合成能连续进行，称为前导链。
4.而另一股子链的合成方向与解链方向相反，它必须等待模板链解开至一定长度后 才能合成一段 ,然后又等待下一段模板暴露出来再合成合成是不连续进行的，称为后随链。
5.这种前导链连续复制而后随链不连续复制的方式称为半不连续复制。在复制中不连续合成的DNA片段称为冈崎片段。
四、真核生物的DNA聚合酶a、β、γ、δ、ε。
1.DNA聚合酶δ是复制中最重要的酶，主要负责子链的延长，相当于原核生物的DNA聚合酶Ⅲ。
2.DNA聚合酶a主要催化合成引物。
3.聚合酶β、ε参与染色体DNA的损伤修复。
4.聚合γ复制线粒体DNA。
五、DNA复制是如何实现高保真性的。
生物体至少有3种机制实现复制保真性:
①严格遵守碱基配对规律:A-T配对，G-C 配对。
②聚合酶在复制延长中对碱基的选择功能:原核生物DNA pol Ⅲ对嘌呤不同构型表现不同亲和力，从而实现其选择功能。
③复制出错时有即时校对功能:在复制过程中一旦DNA新生链3'端出现与模板错误配对的碱基时，DNA聚合酶I即能迅速识别，并利用3'→5'核酸外切酶活性切除错配的核苷酸，然后再通过其5’→3’聚合酶活性连接正确配对的核苷酸。此过程称错修复。
六、原核生物复制中参与DNA解链的相关蛋白。
解链过程主要由DnaA、B、C三种蛋白质共同参与。还有DnaG、SSB、拓扑异构酶。
1.DnaA蛋白辨认并结合于串联重复序列上(AT区),几个DnaA蛋白相互靠近形成DNA蛋白质复合体结构，可促使AT区的DNA进行解链。
2.DnaB蛋白(解旋酶)在DnaC蛋白协同下,结合并沿解链方向移动，解开双链,并置换出DnaA，初步形成复制叉。
3.解链的同时SSB结合在解开的单链上,保护单链模板。
4.DnaG(引物酶):催化RNA引物生成。
5.在解链过程中由拓扑酶来理顺DNA链。DNA拓扑异构酶II把DNA由正超螺旋变为负超螺旋,更好地起模板作用。
七、逆转录酶的三大活性。
1.RNA指导的DNA聚合酶活性。
2.DNA指导的DNA聚合酶活性。
3.RNase H 活性，作用需Zn²+为辅助因子。
八、从单链RNA到双链DNA的生成可分为三步。
1.逆转录酶以病毒基因组RNA为模板,催化dNTP聚合生成DNA互补链,产物是RNA/DNA杂化双链。
2.杂化双链中的RNA被逆转录酶中有RNase活性的组分水解，被感染细胞内的RNase H也可水解RNA链。
3.RNA分解后剩下的单链DNA再用作模板，由逆转录酶催化合成第二条DNA互补链。
九、重组修复。
当DNA双链断裂时,需要重组修复。重组修复是指在重组酶系的作用下,将另一段未受损伤的DNA移到损伤部位,提供正确的模板,进行修复的过程。“边修复,边复制”。
1.同源重组修复:参加重组的两段双链DNA在大于200bp的范围内序列相同，修复后的序列正确。大肠杆菌和酵母在同源重组修复中起关键作用的是ReoA蛋白。
2.非同源末端连接的重组修复:参加重组的两段双链DNA同源性低,修复后的序列中可存在错误，修复不精确。此方式是哺乳动物细胞DNA双链断裂的一种修复方式，起关键作用的是DNA依赖的蛋白激酶(DNA-PK)和XRCC4。
十、简述原核生物的转录终止方式。
①依赖p因子的转录终止:p因子是一种蛋白质。当核心酶移动到终止子时，p因子与其结合并发挥解旋酶活性，解开DNA-RNA杂合双链,使新合成的RNA从模板链上脱落下来，转录终止。
②非依赖p因子的转录终止:核心酶沿模板移动到DNA的终止子序列时，按照该序列转录合成的RNA有两个特征:富含GC碱基对的发夹结构和一串U序列。
发夹结构可影响RNA与模板链的结合，并阻止核心酶前进;U序列则进一步降低RNA与模板链的结合力,从而使转录合成的RNA与模板链分离。随后核心酶与双链DNA解离,转录终止。
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一、填空题
1. 限制性核酸内切酶和DNA连接酶是基因工程中两个重要的工具酶。
2. DNA复制的两大特点是半保留复制和半不连续复制
3. 细菌实施应急反应的信号是ppGpp和pppGpp产生这两种物质的诱导物是 空载tRNA启动子中的元件通常可以分为两种：核心启动子和上游启动子元件
4. 真核生物基因调控主要也是在转录水平上进行的，受大量特定的顺式作用元件和反式作用因子的调控，真核生物的转录调控大多数是通过两者复杂的相互作用来实现的。
5. 在大肠杆菌的转录过程中，RNA聚合酶全酶的σ因子负责转录的精确起始，核心酶负责转录的延伸
6. 真核生物mRNA转录后的加工步骤主要包括加帽、加尾、剪接、编辑
7. 与DNA结合的转录因子大多数以二聚体形式起作用，转录因子与DNA结合的功能域模体常见的有以下几种：螺旋-转角-螺旋、锌指结构、碱性-亮氨酸拉链、和碱性-螺旋-环-螺旋。
8. PCR的基本反应过程包括：高温变性、低温退火、中温延伸三个阶段。
10. 原核生物中DNA复制的主要酶是DNA聚合酶III，在真核生物细胞中核DNA复制的主要酶是DNA聚合酶δ。
11. 基因表达是受调控的，可在多个层次上进行，包括基因水平、转录水平、翻译水平、翻译后水平的调控
12. 蛋白质的生物合成是以mRNA为模板，以氨酰-tRNA为原料直接供体，以核糖体为合成场所。
二、选择题
1)亚硝酸作为一种有效诱变剂，是因为它直接作用于DNA，使碱基中的氨基氧化生成羰 (酮)基，造成碱基配对错误。（对）
2) 真核生物的各种RNA都必须经过剪切、修饰才能成熟。（对）
3) 大肠杆菌的mRNA在翻译蛋白质之前不需要加工。（对）
4) RNA的生物合成不需要引物。（对）
5) 如果没有σ因子，核心酶只能转录出随机起始的、不均一的、无意义的RNA产物。（对）
6) AC-Ds是玉米中的一组转座控制元件，其中Ds 来源于Ac 序列，AC对Ds的作用是顺式的。（对）
7) DNA的复制需要DNA聚合酶和RNA聚合酶。（对）
8) DNA复制时，滞后链的合成需要多个引物。（对）
四、名词解释
CpG岛、Prinbnow区、RNA的编辑、SD序列、操纵子、错义突变、代谢物阻遏效应、冈崎片段、核酶、基因家族、酵母人工染色体
电子商务的必学课程有经济数学，计算机网络原理及应用，电子商务概论，电子商务网站与管理，ASP数据库编程，电子商务经济，电子商务网站安全技术，ERP原理设计与实施
智慧女神美美 6人参与回答 2024-06-02 主要包括马克思主义原理与概论，兽医医药学等科目；他是指一些基础课程的考试。
哇塞小熊 6人参与回答 2024-06-01 一、填空题 1. 限制性核酸内切酶和DNA连接酶是基因工程中两个重要的工具酶。 2. DNA复制的两大特点是半保留复制和半不连续复制 3. 细菌实施应急反应的信
柳絮天涯 3人参与回答 2024-05-31 由于我本身是学计算机的，现在以及未来的研究方向主要是生物信息学。所以，仔细学习一下分子生物学很有必要，因为很多生物的实验原理以及生物学概念（转座子、增强子、顺式
Lucky小钰 3人参与回答 2024-06-02 C值反常：一般来说，越是高等的生物，基因组越长，但也有很多反常现象。 越高等的生物，基因数目越多，基因密度越小。 mRNA转录出后还需要剪切掉内含子序列
冰雪皑皑 3人参与回答 2024-06-02 